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      1. 價格:

        ¥240.00

        MP1003 超低分子量蛋白質Marker(3.3-20.1kDa) 15T

        英文名稱 : Protein Marker(3.3kD-20.1kD)

        儲存條件 : -20℃保存,有效期為一年。

        單位 : 支


        • 產品詳情
        • 產品屬性

        超低分子量蛋白質Marker3.3-20.1kD)使用說明書

        貨號:MP1003

        規格:15T

        保存:-20保存,有效期為一年。

        產品簡介:

        本產品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質組成,分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。可以用來判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5μg,配有一支上樣緩沖液。

        使用說明:

        1、  開封后,溶于150 μL 1×上樣緩沖液,于95水浴5分鐘,可根據需要進行小量分裝,每管10μL-20貯存,每次取一管使用,避免反復凍融。

        2、  使用前取分裝后的小管室溫融化后,95預熱5分鐘即可上樣電泳,用考馬斯亮藍G-250染色后可見5條蛋白帶(見下示意圖)

         

         

         

         

         

         

         


        凝膠的配置方法:

        分離膠

        夾層

        濃縮膠


        20%/4.5mL

        16.5%/4.5mL

        15.5%/4.5mL

        10%/2mL

        4%/2mL

        49.5%T   3%C

        /

        /

        /

        0.407mL

        0.160mL

        49.5%T   6%C

        1.82mL

        1.50mL

        1.395mL

        /

        /

        凝膠沖液

        1.50mL

        1.50mL

        1.50mL

        0.667mL

        0.496mL

        甘油

        0.48mL

        0.48mL

        0.48mL

        /

        /

        ddH2O

        0.70mL

        1.02mL

        1.125mL

        0.926mL

        1.344mL

        10%APS

        40μL

        40μL

        40μL

        20μL

        20μL

        TEMED

        5μL

        5μL

        5μL

        3μL

        3μL

        凝膠制備及染色注意事項:

        1、  先配制分離膠,聚合后再配制夾膠,最后配制濃縮膠,3膠的制膠體積比為4:1.5:1。電時,30v1-2小時后,待指示前沿到達分離膠上沿時,把電壓調至100v,至電泳結束,整個電泳過程大約需要6-8小時。

        2、  由于多肽所含的氨基酸數目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。

        3、  由于SDS-PAGE的圖譜上,蛋白質對數分子量和遷移率成正比直線關系的分子量范圍為15,000-200,000,因此對于分子量小于10000的蛋白質或多肽的分子量,只能根據標準分子量進行估計,推斷其是否落入預測的分子量范圍。

        4、  由于超低分子量多肽(30003000以下),極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會消失。

        5、  電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時間不允許,也可不進行固定直接染色。如果使用配方7進行染色時效果不好或考慮其毒性,請選擇本公司的考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液(貨號:P1300),該產品具有染色快,無,靈敏性高等特點,是常規染色液的替代品

        :小分子蛋白質SDS-PAGE電泳試劑配制


        1 49.5% T  3 % C (配制夾層膠和濃縮膠)

        丙烯酰胺  48g

        甲叉雙丙烯酰胺  1.5g

        ddH20溶解后定容至100mL

         

        249. 5 % T  6 % C (配制分離膠)

        丙烯酰胺 46. 5g

        甲叉雙丙烯酰胺 3. 0g

        ddH20溶解后定容至100mL

         

        3凝膠緩沖液

        Tris  182g

        ddH20   300mL  

        HCl調節pH值至8.45

        ddH20定容至 500mL

        再加入SDS  1.5g

         

        4 10×陽極緩沖液(下槽緩沖液〕

        Tris 121. 1 g

        ddH20  400mL

        HCl調pH值至8.9

        ddH20定容至 500mL

         

        5極緩沖液(上槽緩沖液)

        Tris  12 .11g

        Tricine  17.92g

        SDS  1g

        ddH2O定容至1000mL

        此溶液不用調節pH

         

        6固定液

        0.5%

        30%

        ddH20定容至100mL

         

        7染色液

        50% 甲醇

        10%

        0.2% 考馬斯G-250

        ddH20定容至500mL



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        MP1014 低分子量蛋白質Marker(14.4-97.4KDa) 20T
        MP1043 次高分子量蛋白質Marker(43-200kDa) 10T
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