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      1. 價格:

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        CB6100 人外周血淋巴細胞分離液 200ml

        別名 : 人淋巴細胞分離液

        英文名稱 : Lymphocyte Separation Medium (Human)

        儲存條件 : 15?25℃避光保存

        單位 : 200ml/瓶 20瓶/箱


        • 產品詳情
        • 產品屬性

        人外周血淋巴細胞分離液使用說明書

        貨號: CB6100

        規格:200mL

        保存:18-25避光儲存,需無菌操作和保存。不可冷凍或冷藏,有效期至少2年。

        產品簡介:

        外周血中單個核細胞包括淋巴細胞和單核細胞等細胞,其體積、形態和密度與其他細胞不同,紅細胞和粒細胞密度較大,為1.090 g/ml 左右,而淋巴細胞和單核細胞密度為1.0751.090 g/ml,血小板為1.0301.035 g/ml。經過密度梯度離心使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,從而將各種血細胞加以分離。本品適用于從人抗凝血液中分離單個核細胞(主要為淋巴細胞),無菌條件下所分離的細胞可用于免疫學檢測。

        分離方法說明及圖例:

        首先取新鮮抗凝血按體積比1:1 比例與樣本稀釋液(可用生理鹽水代替)混勻,根據稀釋后的體積,如果體積小于3ml,則在離心管中先加入3ml分離液,再在液面上小心加上血液,如果體積大于3ml,則需要等體積的分離液,但二者的總體積不能超過離心管的三分之二,否則在離心過程中會影響分離效果。注意:加入的二者不能混,不能沖破彼此液面,參考示意圖。以400g-1000g(體積越大離心力越大時間越長具體需要自行優化,但不能超過1200g)離心20-30分鐘,此時離心管中由上至下細胞分四層。第一層:為血漿層。第二層:為環狀乳白色淋巴細胞層。第三層:為透明分離液層。第四層:為紅細胞層。收集第二層細胞放入含生理鹽水4-5ml的試管中,充分混勻后,以400-1000g離心20-30分鐘。沉淀經2次洗滌后即得所需淋巴細胞。提取率約為80%

        注意事項:

        1本分離液要求血液為新鮮抗凝血最好在采血2小時內使用,避免冷凍和冷藏;在收集血液和分離過程中,應注意無菌操作,避免微生物污染。血液的粘稠度可能影響分離的產量,因此可以適當調整與生理鹽水的稀釋比例。

        2本實驗要求,在正常大氣壓下,分離液、分離樣本以及分離環境溫度為20±2。分離液在低溫時呈較高密度,在高溫時呈較低密度。細胞分離液從冰箱取出后,不可立即使用,操作前可將樣本和分離液置于20水浴中復溫20分鐘以保證分離溫度。

        3由于各品牌離心機的性能不同,國內南北地區溫度環境和四季的差異,可能影響分離效果,用戶可以調節離心轉數和離心時間,摸索最佳的分離條件(具體分離條件各實驗室自定)。

        4吸取過多的淋巴細胞上面的血漿層可能會導致血漿蛋白及血小板的混雜。

        5最好使用無靜電反應的離心管,推薦使用未經過堿處理的玻璃離心管。

        6最優抗凝劑選擇:EDTA、枸櫞酸、肝素。應注意在血液稀釋過程中應去除抗凝劑體積。

        產品性能指標:

        密度                                               1.077±0.001g/ml

        pH                             7.0-7.5

        滲透壓                         280-340mOsmol/kg

        內毒素                         ≤0.5EU/ml

        無菌                           直接接種培養14 天后培養基澄清

        澄明度及不溶性顆粒物           50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下

         

         


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